Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GCAGC(N)8 | GCAGC(N)8↑ |
| CGTCG(N)12 | CGTCG(N)12↓ |
Источник: Bacillus stearothermophilus V1
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК pBR322 за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК pBR322
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 100 | 75 | 75 | 75 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 55°С
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G.
Примечание:
При 37°С активность 10% от максимальной.
Литература:
Дедков В.С., Мурадов С.В., Шинкаренко Н.M., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2001).
