Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GACNNNNNGTC | GACNNN↑NNGTC |
| CTGNNNNNCAG | CTGNN↓NNNCAG |
Источник: Deinococcus radiodurans EA
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 75 | 10 | 10 | 100 | 40 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 5% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой. Сшивка лучше в присутствии 10% ПЭГ.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Литература:
Abdurashitov, M.A., Nayakshina, T.N., Dedkov, V.S., Popichenko, D.V., Degtyarev, S.K. Unpublished observations.(2003)
