Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CGGCCG | C↑GGCCG |
| GCCGGC | GCCGG↓C |
Источник: Bacillus stearothermophilus X3
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 100 | 50 | 10 | 25 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 8.2); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Для периода более трех месяцев рекомендуется хранить при -70°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и около 80% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 50°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O
Примечание:
Литература:
Килева E.В., Дедков В.С., Шевченко A.В., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1996).
