Aox I

5,500.00 22,000.00 

  • CNY: 84.36 ¥ - 337.45 ¥

MD ДНК эндонуклеаза Aox I. Метилзависимая ДНК эндонуклеаза отличается от эндонуклеаз рестрикции тем, что режет ДНК исключительно при наличии метильных групп в сайте узнавании. При отсутствии метилирования гидролиз отсутствует.

  • Концентрация: 500 е.а./мл
  • Сайт узнавания: ↑RG(5mC)Y / ↓RG(5mC)Y
  • Источник: Arthrobacter oxydans 25K
  • Оптимальный буфер: SE-буфер AoxI
  • Оптимальная температура: 60
  • Температура инактивации, 20 мин при: N
Артикул: E569 Категория:

Описание

Сайт узнавания:

↑RG(5mC)Y
↓RG(5mC)Y

Источник: Arthrobacter oxydans 25K

Определение единицы активности:

За одну единицу активности принимается количество фермента, необходимое для полного гидролиза линейной формы 1 мкг плазмиды pMHaeIII/DriI за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси. При этом происходит исчезновение исходной линейной формы плазмиды pMHaeIII/DriI (см. рисунок ниже, дор. 4).

Определение активности AoxI
В каждом случае проводилась инкубация фермента с 1 мкг ДНК pMHaeIII/DriI в 50 мкл реакционной смеси (см. Единица активности). После инкубации аликвота реакционной смеси 15 мкл наносилась на гель.

Дорожки:
1: исходная ДНК pMHaeIII/DriI
2: 0.5 мкл Aox I
3: 1 мкл Aox I
4: 2 мкл Aox I
5: 1 Kb SE ДНК-маркеры

Продукты разделены в 1%-ном агарозном геле в буфере TAE.

Субстрат для определения активности:

Субстрат pMHaeIII/DriI представляет собой ДНК плазмиды pMHaeIII, линеаризованной эндонуклеазой рестрикции DriI. Плазмида pMHaeIII содержит ген ДНК-метилтрансферазы M.HaeIII из Haemophilus aegyptuus, которая модифицирует сайт узнавания
5` GGCC 3` с образованием 5` GG(5mC)C 3`/3` C(5mC)GG 5`.

Оптимальный буфер: SE-буфер AoxI

Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:

B G O W Y ROSE
75 25 10 25 75 100

Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.4); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.

Лигирование:

Неспецифический гидролиз:

Не наблюдается неспецифического гидролиза при инкубации 1 ед фермента Aox I с 1 мкг ДНК фага лямбда в течение 16 часов при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.

Чувствительность к метилированию: Фермент расщепляет только метилированную ДНК.
Не расщепляет немодифицированную ДНК .

С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер AoxI.

Примечание:

Литература:

1. Чернухин В.А., Беличенко О.А., Тарасова Г.В., Гончар Д.А., Акишев А.Г., Дедков В.С., Михненкова Н.А., Дегтярев С.Х. Штамм бактерии Arthrobacter oxydans — продуцент сайт-специфической эндонуклеазы Aox I. // Патент на изобретение RU 2399663 С1 (2009).

Доступные варианты

АртикулРазмер фасовкиФасовкаЦена 
E569S50 е.а.5,500.00 
E570L250 е.а.22,000.00