Acl I

Название фермента Acl I
Прототип AclI
Известные аналоги Psp1406I
Артикул SE-E011
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… AA▼CGTT …3'
3'… TTGC▲AA …5'
Источник Acinetobacter calcoaceticus
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
000010080
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 0.05% Triton X-100; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 2-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA
Примечания Для достижения 100% активности следует добавлять BSA в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. S.Kh. Degtyarev, M.A. Abdurashitov, A.A. Kolyhalov, N.I. Rechkunova Acl I, a new restriction endonuclease from Acinetobacter calcoaceticus recognizing 5′-AA^CGTT -3′. // Nucleic Acids Research, Vol. 20, No. 14, 37-87 (1992). (На английском)
// Код для некролога