AluB I

Название фермента AluB I
Прототип AluI
Артикул SE-E549
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… AG▼CT …3'
3'… TC▲GA …5'
Источник Arthrobacter luteus B
Оптимальный буфер SE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
1007510107560
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Гидролизует метилированный и полуметилированный по внутреннему цитозину сайт A G (5mC)T и AG(5mC)T T(5mC) G A TC G A
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер B, BSA
Примечания AluBI является изошизомером AluI Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. В.А. Чернухин, А.А. Болтенгаген, Г.В. Тарасова, В.С. Дедков, С.Х. Дегтярев Новая эндонуклеаза рестрикции AluBI из Arthrobacter luteus B- изошизомер AluI, нечувствительный к присутствию 5-метилцитозина в сайте узнавания AGCT. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю.А.Овчинникова, Т3, №1, С. 21-27 (2007).
  2. В.А. Чернухин, А.А. Болтенгаген, Г.В. Тарасова, В.С. Дедков, С.Х. Дегтярев Штамм бактерий Arthrobacter luteus B - продуцент сайт-специфической эндонуклеазы AluBI // Патент на изобретение RU 2340670 С1 (2007).
// Код для некролога