Описание
Сайт узнавания:
| CCANNNN↑NTGG |
| GGTN↓NNNNACC |
Источник: Acinetobacter calcoaceticus B7
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда(dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (dcm-)
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 100 | 25 | 50 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm- метилированием (CmCWGG): CCANNNCCTGG или CCAGGNNNTGG.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE
Примечание:
Литература:
Дедков В.С., Репин В.E., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х., Верхозина В.A., Виноградова T.П., Изв. Сиб. Отд. Акад. Наук СССР 1: 35-37 (1990).
