Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GACGC(N)5 | GACGC(N)5↑ |
| CTGCG(N)10 | CTGCG(N)10↓ |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Hga I из Haemophilus gallinarum
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг pBR322 ДНК за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
pBR322 ДНК
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 75 | 10 | 25 | 50 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Не рекомендуется инкубация более 2 ед фермента на 1 мкг ДНК более 1 часа при 37°С
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Не рекомендуется инкубация более 2 ед фермента на 1 мкг ДНК более 1 часа при 37°С.
Литература:
Brown N.L., Smith M. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 74: 3213-3216 (1977).Sugisaki, H. Gene 3: 17-28 (1978).
