X-Gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид)

2,300.00 9,200.00 

  • CNY: 183.70 ¥ - 734.80 ¥

Артикул: SE-S003 Категория:

Выберите вариант:

Кат.№ФасовкаЦена 
S0030.1 г2,300.00 
  • CNY: 183.70 ¥
S0040.5 г9,200.00 
  • CNY: 734.80 ¥

Описание

Описание: X-Gal используется совместно с IPTG для определения lac-фенотипа при отборе белых/синих колоний E.coli. X-Gal представляет собой инертный хромогенный субстрат для β-галактозидазы – фермента, расщепляющего лактозу. β-галактозидаза гидролизует X-Gal с образованием бесцветной галактозы и 4-хлор-3-бром-индиго, который имеет синюю окраску. Индукция гена lacZ путем добавления IPTG приводит к расщеплению X-Gal и появлению синих колоний E.coli. В случае нарушения структуры гена lacZ за счет встройки генетического материала (или делеции) цвет колоний будет белым.

Стоковый раствор X-Gal следует готовить в необходимом количестве непосредственно перед его добавлением в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C. В качестве растворителя для X-Gal используется
диметилсульфоксид (DMSO). Рекомендуется приготовить стоковый раствор X-Gal в DMSO с концентрацией 40-100 мг/мл. Конечная концентрация X-Gal в среде LB может быть 40-100 мкг/мл (для получения белых/синих колоний E.coli).

 

Вариант применения:

На 100 мл расплавленного LB-агара (50-55 o C) взять:
100 мкл стокового раствора X-Gal (10 мг сухого X-Gal растворить в 100 мкл DMSO в отдельной стерильной микропробирке);
40 мкл 0,5 М водного раствора IPTG;
необходимое количество антибиотика (например, ампициллина до 50 мкг/мл).

Все тщательно перемешать, разлить по чашкам Петри. Подсушить в стерильном боксе под УФ в течение 20-30 мин.