Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GACNNNGTC | GACN↑NNGTC |
CTGNNNCAG | CTGNN↓NCAG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Tth111 I из Thermus Thermophilus 111
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
75 | 50 | 10 | 10 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 500 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента 10% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 65°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Shinomiya, T., Sato, S. Nucleic Acids Res. 8: 43-56 (1980).