AsiS I

Название ферментаAsiS I
Прототип#Н/Д
Известные аналогиRga I, SgfI
АртикулSE-E159
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GCGAT▼CGC …3'
3'… CGC▲TAGCG …5'
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген AsiSI из Arthrobacter species S
Оптимальный буферSE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
100750102525
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК Аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК Аденовируса-2
Условия хранения20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюНе блокируется dam-метилированием при перекрывании (G m ATC): GC GATC GC Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер B.
ПримечанияФермент обладает звездчатой активностью.
Литература
  1. Неопубликованные данные Абдурашитов М.А., Шинкаренко Н.M., Шевченко A.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные. 2000
// Код для некролога