Bpu10 I

Название фермента Bpu10 I
Прототип Bpu10I
Артикул SE-E149
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… CC▼TNAGC …3'
3'… GGANT▲CG …5'
Источник Из штаммов E.coli, содержащих рекомбинантные плазмиды
Оптимальный буфер SE-буфер K (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM KCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
1025505025100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага Лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 90% из них могут быть повторно расщеплены. Сшивка лучше в присутствии 10% ПЭГ.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 1 часa при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер K
Примечания Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности или неполному разрезанию ДНК. Рекомендуется увеличение времени инкубации вместо использования избытка фермента
Литература
  4. С.Х. Дегтярев, П.А. Жилкин, Г.Г. Приходько, Н.И. Речкунова, В.Е. Репин Определение субстратной специфичности рестриктазы Bpu10I с необычным участком узнавания. // Молекулярная биология, Т.23, Вып.4, 1051-1056 (1989).
// Код для некролога