Bse21 I

Название ферментаBse21 I
ПрототипSauI
Известные аналогиAxyI, Bsu36I, Eco81I, SauI
АртикулSE-E037
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… CC▼TNAGG …3'
3'… GGANT▲CC …5'
ИсточникBacillus species 21
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
5050102510040
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Условия хранения10 mM KH 2 PO 4 (pH 7.4); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 2-кратным избытком фермента около 50% фрагментов ДНК сшиваются высокоактивной ДНК-лигазой в присутствии 10%ПЭГ и более 90% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y
Литература
  2. V.S. Dedkov, S.Kh. Degtyarev Actinobacillus and Streptococcus: producers of isoschizomers of the restriction endonucleases R.Hph I, R.Sau I, R.Nhe I, R.Mbo I and R.Swa I. // Biol. Chem., Vol. 379, 573-574, (1998). (На английском)
  3. С.Х. Дегтярев, А.А. Колыхалов, В.Е. Репин, Н.И. Речкунова, С.В. Нетесов Установление специфичности эндонуклеазы рестрикции Bse21I. // Известия СО АН СССР, Серия биологических наук, вып.1, 138-139 (1990).
  4. С.Х. Дегтярев, В.Е. Репин, Н.И. Речкунова, Л.С. Шевченко, Е.П. Иванова, В.А. Рассказов Штамм бактерий Bacillus species 21 - продуцент сайт-специфической эндонуклеазы Bse21I. // Авторское свидетельство SU 1518372 (1989).
  5. В.Е. Репин, С.В. Польшина, Н.А. Божко, С.Х. Дегтярев Культивирование Bacillus species 21 - продуцента эндонуклеазы рестрикции Bse21I. // Извести СО АН СССР, Серия биологических наук, вып.1, 108-111 (1989).
// Код для некролога