Bst2B I

Название ферментаBst2B I
ПрототипBsiI
Известные аналогиBauI, BsiI, BssSI
АртикулSE-E043
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Сайт узнавания
5'… C▼TCGTG …3'
3'… GAGCA▲C …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus 2B
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура60 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75251025100100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°C.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y, BSA
ПримечанияДля достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Неопубликованные данные Абдурашитов M.A., Беличенко O.A., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
  2. В.С. Дедков, Н.И. Речкунова, С.Х. Дегтярев, П.А. Жилкин, А.А. Колыхалов, В.А. Верхозина Штамм бактерий Bacillus sphaericus - продуцент рестриктазы BsiI. // Авторское свидетельство SU 1784642 (1992).
  3. С.Х. Дегтярев, А.А. Колыхалов, Н.И. Речкунова, В.С. Дедков, П.А. Жилкин BsiI - новая необычная эндонуклеаза рестрикции. // Молекулярная биология, т.24, Вып. 1, 244-247 (1990).
// Код для некролога