Bst4C I

Название ферментаBst4C I
ПрототипTsp4CI
Известные аналогиHpyCH4III, TaaI, Tsp4CI
АртикулSE-E265
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ACN▼GT …3'
3'… TG▲NCA …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus 4C
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура65 °C
Температура инактивациине инактивируется
Активность в буферах
BGOWYROSE
7575102510050
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента ~50% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 65°C.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y
Литература
  1. Неопубликованные данные Шинкаренко Н.M., Шевченко A.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1997).
// Код для некролога