BstDE I

Название фермента BstDE I
Прототип DdeI
Известные аналоги DdeI, HpyF3I
Артикул SE-E227
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… C▼TNAG …3'
3'… GANT▲C …5'
Источник Bacillus stearothermophilus DE
Оптимальный буфер SE-буфер G (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 60 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75100255010100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК cшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 60°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер G. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания При 37°С активность 50%-75% от максимальной.
Литература
  4. Неопубликованные данные Шинкаренко Н.M., Шевченко A.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
// Код для некролога