BstHH I

Название фермента BstHH I
Прототип HhaI
Известные аналоги AspLE I, CfoI, HhaI, Hin6I, HinP1I, HspA I
Артикул SE-E143
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GCG▼C …3'
3'… C▲GCG …5'
Источник Bacillus stearothermophilus HH
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 50 °C
Температура инактивации не инактивируется
Активность в буферах
BGOWYROSE
75502550100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С
Лигирование После гидролиза 50-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 100 ед фермента в течение 16 часов при 50°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием 5`- G(5mC)GC - 3`/3`- CG(5mC)G - 5` и 5`- G(5mC)GC - 3`/3`- CGCG - 5`. Не блокируется при метилировании 5`- GCG(5mC) - 3`/3`- (5mC)GCG - 5` и 5`- GCG(5mC) - 3`/3`- CGCG - 5`.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Неопубликованные данные Шаповалова M.A., Абдурашитов M.A., Туманова И.Ю., Дедков В.С., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (2001).
// Код для некролога