BstMB I

Название ферментаBstMB I
ПрототипMboI
Известные аналогиBfuCI, Bsp143I, DpnII, Kzo9 I, MboI, NdeII, Sau3AI, BstKT I
АртикулSE-E119
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ▼GATC …3'
3'… CTAG▲ …5'
ИсточникBacillus stearothermophillus MB
Оптимальный буферSE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура65 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
10251007510100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (dam-)
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 65°С
Чувствительность к метилированиюБлокируется при перекрывании dam-метилированием (G m ATC): GATC. Не гидролизует полуметилированный по аденину сайт 5`-G m ATC-3` / 5`-GATC-3`. Не блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер O
Литература
  1. Неопубликованные данные Коваленко К., Килева Е.В., Мезенцева Н.В., Михненкова Н.А., Дедков В.С., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (2004).
// Код для некролога