Неопубликованные данные
Неопубликованные данные (2000).
BstPA I
| Название фермента | BstPA I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | PshAI | ||||||||||||
| Известные аналоги | BoxI, PshAI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E299 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… GACNN▼NNGTC …3' 3'… CTGNN▲NNCAG …5' | ||||||||||||
| Источник | Bacillus stearothermophillus PA | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 65 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | не инактивируется | ||||||||||||
| Активность в буферах |
| ||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С. | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 5-кратным избытком фермента менее 5% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 25°С | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | не проверялось | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер Y. | ||||||||||||
| Примечания | Большой избыток фермента или инкубация при 65°С более 16 часов приводит к появлению звездчатой активности. | ||||||||||||
| Литература |