BstSC I

Название ферментаBstSC I
ПрототипScrFI
Известные аналогиBssKI, StyD4I, Bme1390I, MspR9 I, ScrFI
АртикулSE-E307
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ▼CCNGG …3'
3'… GGNCC▲ …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus SC
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура55 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
5050505010060
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dcm-) за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (dcm-)
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 3 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированиюБлокируется при перекрывании dcm- метилированием: (C m CWGG) CCWGG.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y.
ПримечанияПри 37°С активность 10% от максимальной.
Литература
// Код для некролога