BstSF I

Название ферментаBstSF I
ПрототипSfeI
Известные аналогиBfmI, BpcI, SfcI, SfeI
АртикулSE-E197
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… C▼TRYAG …3'
3'… GAYRT▲C …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus SF
Оптимальный буферSE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура60 °C
Температура инактивациине инактивируется
Активность в буферах
BGOWYROSE
75251005050100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 2-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер O, BSA.
ПримечанияДля достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  2. Неопубликованные данные Беличенко O.A., Шевченко A.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
  3. С.Х. Дегтярев, Г.Г. Приходько, Н.И. Речкунова Определение субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции SfeI. // Биоорганическая химия, Т.14, № 6, 848-849 (1988).
// Код для некролога