Сайт-специфическая ДНК-эндонуклеаза FaiI узнает вырожденную четырехнуклеотидную последовательность 5`-YA^TR-3`.
// Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, Т. 7 , № 2 ,с. 11-16 (2011).
Fai I
| Название фермента | Fai I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | FaiI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E551 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… YA▼TR …3' 3'… RT▲AY …5' | ||||||||||||
| Источник | Flavobacterium aquatile B15 | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 50 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 80 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
| ||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента необходимое для гидролиза 1 pmol олигонуклеотидного дуплекса указанной структуры за 1 час при 50°С в 20 μl реакционной смеси | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | Олигонуклеотидный дуплекс 5`-CGAGTTCA^TAGCTGGGCCCAAC-3` 3`-GCTCAAGT^ATCGACCCGGGTTG-5` | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 3-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК pUC19 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | не проверялось | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер B. | ||||||||||||
| Литература |