Неопубликованные данные
Неопубликованные данные (2001).
Pce I
| Название фермента | Pce I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | StuI | ||||||||||||
| Известные аналоги | AatI, Eco147I, SseBI, StuI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E105 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Доступен | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… AGG▼CCT …3' 3'… TCC▲GGA …5' |
||||||||||||
| Источник | Planococcus citreus | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 50 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 80 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
|
||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 20-кратным избытком фермента 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 50°С | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | Не блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG) AGG CC T GG | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo (E105T и E106T) прикладывается только буфер ROSE. | ||||||||||||
| Примечания | При температуре 37°С активность 50% от максимальной. | ||||||||||||
| Литература |