Неопубликованные данные
Неопубликованные данные (1994).
Ple19 I
| Название фермента | Ple19 I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | PvuI | ||||||||||||
| Известные аналоги | MvrI, PvuI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E195 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… CGAT▼CG …3' 3'… GC▲TAGC …5' |
||||||||||||
| Источник | Pseudomonas lemoignei 19 | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 37 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 65 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
|
||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (HindIII-digest) | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 5-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК Ad2 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг лямбда ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | Не блокируется dam-метилированием при перекрывании (G m ATC): C GATC G | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер Y. | ||||||||||||
| Примечания | |||||||||||||
| Литература |