Ple19 I

Название ферментаPle19 I
ПрототипPvuI
Известные аналогиMvrI, PvuI
АртикулSE-E195
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… CGAT▼CG …3'
3'… GC▲TAGC …5'
ИсточникPseudomonas lemoignei 19
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75752525100100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК Ad2 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг лямбда ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюНе блокируется dam-метилированием при перекрывании (G m ATC): C GATC G
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y.
Литература
  1. Неопубликованные данные Семенченко Г.В., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1994).
// Код для некролога