Psp6 I

Название ферментаPsp6 I
ПрототипEcoRII
Известные аналогиAjn I, EcoRII, PspGI, BptI, BseBI, Bst2U I, BstNI, BstOI, MvaI
АртикулSE-E453
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ▼CCWGG …3'
3'… GGWCC▲ …5'
ИсточникPseudomonas species 6
Оптимальный буферSE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура55 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
1005010257510
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dcm-) за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (dcm-)
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 3-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 4 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированиюБлокируется при перекрывании dcm-метилированием (C m CWGG): CCWGG.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер B.
ПримечанияПри 37°С активность очень низкая.
Литература
  2. Неопубликованные данные Дедков В.С., Томилова Ю.Э., Килева Е.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (2002)
// Код для некролога