Rsa I

Название ферментаRsa I
ПрототипRsaI
Известные аналогиAfaI, Csp6I
АртикулSE-E113
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GT▼AC …3'
3'… CA▲TG …5'
ИсточникRhodopseudomonas sphaeroides
Оптимальный буферSE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивациине инактивируется
Активность в буферах
BGOWYROSE
100500-10507550
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 20-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер B. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература
  4. Л.Р. Лебедев, Н.М. Пустошилова, В.Е. Репин, С.Х. Дегтярев Выделение и изучение свойств эндонуклеазы рестрикции RsaI из Rhodopseudomonas sphaeroides. // Прикладная биохимия и микробиология, т.27, вып.3, 330-337 (1991).
  5. Г.Е. Акулинин, В.Е. Репин, С.Х. Дегтярев Способ получения эндонуклеазы рестрикции Rsa I из Rhodopseudomonas sphaeroides // Авторское свидетельство SU1431328 (1986).
  6. Сторонняя публикация Lynn, S.P., Cohen, L.K., Kaplan, S., Gardner, J.F.J. Bacteriol. 142: 380-383 (1980).
// Код для некролога