Tru9 I

Название ферментаTru9 I
ПрототипMseI
Известные аналогиMseI, Tru1I
АртикулSE-E199
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… T▼TAA …3'
3'… AAT▲T …5'
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген Tru9I из Thermus ruber 9
Оптимальный буферSE-буфер W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура65 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75252510050100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl-(pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 20-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 65°С.
Чувствительность к метилированиюБлокируется метилированием TTA m A.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер W. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература
  3. S.Kh. Degtyarev, E.A. Prikhodko, N.I. Rechkunova, Y.A. Gorbunov Interaction of Vsp I and Tru9 I restriction endonuclease with synthetic oligonucleotides. // Biochimica et Biophysica Acta, 1172, 89-94 (1993). (На английском)
  4. Г.Г. Приходько, Н.И. Речкунова, С.Х. Дегтярев Установление субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции Tru9I. // Сибирский биологический журнал, Вып.1, 57-59 (1991).
// Код для некролога