Xba I

Название фермента Xba I
Прототип XbaI
Артикул SE-E141
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Доступна
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… T▼CTAGA …3'
3'… AGATC▲T …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген XbaI из Xanthomonas badrii
Оптимальный буфер SE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
7575100507525
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-/ HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда (dam-/HindIII-digest)
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется при перекрывании dam-метилированием (G m ATC) TCTA GA TC.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер O, BSA (кроме E141m, E141T и E142T). Для фасовок Turbo (E141T и E142T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
// Код для некролога