BstMA I

Название фермента BstMA I
Прототип BsmAI
Известные аналоги Alw26I, BsmAI
Артикул SE-E291
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IISiФерменты типа IIS распознают асимметричные последовательности ДНК и разрезают за пределами сайта узнавания на фиксированном расстоянии. Широко используются в Golden Gate сборке.
Сайт узнавания
5'… GTCTCN▼ …3'
3'… CAGAG(N)5▲ …5'
Источник Bacillus stearothermophilus MA
Оптимальный буфер SE-буфер W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 55 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25505010075100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 50-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 100 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W, BSA
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Неопубликованные данные Чернухин В.А., Михненкова Н.А., Килева Е.В., Мезенцева Н.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (2005) Абдурашитов М.А., Томилов В.Н, Чернухин В.А., Дегтярев С.Х Физическая карта расщепления эндонуклеазами рестрикции Alu повторов человека // BMC Molecular Biology 2008, 9:305 (на английском языке)
// Код для некролога