Fae I

Название фермента Fae I
Прототип NlaIII
Известные аналоги Hin1II, Hsp92II, NlaIII, CviAII, Fat I
Артикул SE-E495
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… CATG▼ …3'
3'… ▲GTAC …5'
Источник Flavobacterium aquatile N3
Оптимальный буфер SE-буфер FaeI (33 mM Tris-ацетат (pH 8.3 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
2550101075100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг pUC19 ДНК за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности pUC19 ДНК
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°*С.
Лигирование После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию Блокируется метилированием C m ATG
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер FaeI, BSA.
Примечания FaeI может применяться для гидролиза ПЦР-фрагментов только после их дополнительной очистки. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  2. Неопубликованные данные Чернухин В.А., Килева Е.В., Томилова Ю.Э., Дедков В.С Неопубликованные данные (2006).
// Код для некролога