Fau I

Название фермента Fau I
Прототип FauI
Известные аналоги SmuI
Артикул SE-E209
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IISiФерменты типа IIS распознают асимметричные последовательности ДНК и разрезают за пределами сайта узнавания на фиксированном расстоянии. Широко используются в Golden Gate сборке.
Сайт узнавания
5'… CCCGC(N)4▼ …3'
3'… GGGCG(N)6▲ …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Fau I из Flavobacterium aquatili
Оптимальный буфер SE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 55 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
10025005050
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 55°С
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер B.
Примечания
Литература
  2. М.А. Абдурашитов, С.С. Охапкина, Н.А. Нетесова, Л.Н. Голикова, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Уникальная система рестрикции-модификации FauI: клонирование и сравнительный анализ структуры белков. // Молекулярная биология, т. 37, № 4, с. 619-624 (2003).
  3. S.Kh. Degtyarev, N.A. Netesova, V.E. Chizhikov, M.A. Abdurashitov Cloning and characterization of the gene encoding M.Fau I DNA methyltransferase. // Biol. Chem., Vol. 379, 567-568 (1998). (На английском)
  4. В.С. Дедков, С.Х. Дегтярев, Н.И. Речкунова, В.Е. Репин, В.А. Верхозина, Т.П. Виноградова Штамм бактерий Flavobacterium acuatile - продуцент рестриктазы Fan I. // Авторское свидетельство SU1661213 (1991).
  5. С.Х. Дегтярев, А.А. Колыхалов, Н.И. Речкунова, В.С. Дедков Определение субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции FauI. // Биоорганическая химия, Т.15, № 1, 130-132 (1989).
// Код для некролога