Description
Сайт узнавания:
GAGTCNNNN↑NN |
CTCAGNNNNNN |
Источник: Bacillus stearothermophilus 9
Описание:
Сайт-специфическая эндонуклеаза, которая разрезает только одну цепь двухцепочечной субстратной ДНК.
Определение единицы активности:
За одну единицу активности принимали количество фермента необходимое для полного гидролиза 1 мкг ДНК фага Т7 за 1 час при 550С
Реакционный буфер: SE-буфер N.Bst9 I
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.5 mM EDTA; 1 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК фага Т7 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер N.Bst9I
Примечание:
Использование высоких концентраций фермента, а также условия реакции отличные от оптимальных, могут приводить к появлению звездчатой активности.
Фермент способен расщеплять одноцепочечную ДНК [1].
Литература:
1. Абдурашитов М.А., Беличенко О.А., Шевченко А.В., Дегтярев С.Х. Сайт-специфическая никаза N.BstSE из Bacillus stearothermophilus SE-589.// Молекулярная биология, т.30, №.6, 754-758 (1996).