Ajn I

Название ферментаAjn I
ПрототипEcoRII
Известные аналогиEcoRII, Psp6 I, PspGI, BptI, BseBI, Bst2U I, BstNI, BstOI, MvaI
АртикулSE-E473
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ▼CCWGG …3'
3'… GGWCC▲ …5'
ИсточникAcinetobacter johnsonii R2
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура55 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
2510102510050
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага Лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 3-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 6 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированиюНе блокируется dcm-метилированием при перекрывании (C m CWGG): CCWGG в отличие от EcoRII
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y
ПримечанияПри 37°С активность 10% от максимальной.
Литература
// Код для некролога