Bme18 I

Название ферментаBme18 I
ПрототипAvaII
Известные аналогиAvaII, Eco47I, SinI, VpaK11BI
АртикулSE-E029
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… G▼GWCC …3'
3'… CCWG▲G …5'
ИсточникBacillus megaterium 18
Оптимальный буферSE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
1025100751080
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюПри перекрывании dcm-метилированием гидролиз затруднен GGW CC WGG
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер O. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература
  2. С.Х. Дегтярев, Н.И. Речкунова, А.А. Гринев, В.С. Дедков Выявление и определение субстратной специфичности эндонуклеаз рестрикции Bme18I и Kzo9I. // Известия СО АН СССР, Серия биологических наук, вып.3, 25-26 (1989).
// Код для некролога