Bmu I
| Название фермента | Bmu I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | BfiI | ||||||||||||
| Известные аналоги | BfiI, BmrI | ||||||||||||
| Артикул | SE-E487 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Тип рестриктазы | Тип IISiФерменты типа IIS распознают асимметричные последовательности ДНК и разрезают за пределами сайта узнавания на фиксированном расстоянии. Широко используются в Golden Gate сборке. | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… ACTGGG(N)5▼ …3' 3'… TGACCC(N)4▲ …5' | ||||||||||||
| Источник | Bacillus megaterium S87 | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 37 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 65 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
| ||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (HindIII-digest) | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 75% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены. | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 0,5 ед фермента в течение 4 часов при 37°С.Длительная инкубация не рекомендуется. | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | не проверялось | ||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 Х SE-буфер Y | ||||||||||||
| Примечания | Фермент активен в присутствии ЭДТА. Длительная инкубация не рекомендуется. | ||||||||||||
| Литература | Публикации не найдены. |