BseP I

Название ферментаBseP I
ПрототипBsePI
Известные аналогиBssHII, PauI
АртикулSE-E181
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… G▼CGCGC …3'
3'… CGCGC▲G …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus P
Оптимальный буферSE-буфер G (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура50 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
50100755050100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 10 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 50°C.
Чувствительность к метилированиюБлокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер G
Литература
  1. Неопубликованные данные Langdale, J.A., Myers, P.A., Roberts, R.J Unpublished observations (1992).
// Код для некролога