Bst2B I

Название фермента Bst2B I
Прототип BsiI
Известные аналоги BauI, BsiI, BssSI
Артикул SE-E043
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… C▼TCGTG …3'
3'… GAGCA▲C …5'
Источник Bacillus stearothermophilus 2B
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 60 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75251025100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°C.
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Неопубликованные данные Абдурашитов M.A., Беличенко O.A., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
  2. В.С. Дедков, Н.И. Речкунова, С.Х. Дегтярев, П.А. Жилкин, А.А. Колыхалов, В.А. Верхозина Штамм бактерий Bacillus sphaericus - продуцент рестриктазы BsiI. // Авторское свидетельство SU 1784642 (1992).
  3. С.Х. Дегтярев, А.А. Колыхалов, Н.И. Речкунова, В.С. Дедков, П.А. Жилкин BsiI - новая необычная эндонуклеаза рестрикции. // Молекулярная биология, т.24, Вып. 1, 244-247 (1990).
// Код для некролога