EmiS6 I

Название ферментаEmiS6 I
ПрототипKsp632I
АртикулSE-E609
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Сайт узнавания
5'… CTCTTC(N)1▼ …3'
3'… GAGAAG(N)4▲ …5'
ИсточникExiguobacterium mexicanum 6
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75-10050-7525-5025-5010025
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37°С за 1 час.
Субстрат для определения активностиλ-ДНК
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин Хранить при -20°С
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг λ-ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. После инкубации 5 ед фермента в течение 3 часов неспецифического гидролиза одно и двуцепочечного олигонуклеотидов не наблюдается.
С ферментом поставляется10 x SE-Буфер Y
Литература
// Код для некролога