Эндонуклеаза рестрикции EmiS6I, изошизомер Ksp632I, узнает непалиндромную последовательность ДНК 5’-CTCTTC(1/4)-3’.
// ДНК-узнающие ферменты, том 2025(4), DOI: 10.26213/3034-4301.2025.7.4.002 (2025).
EmiS6 I
| Название фермента | EmiS6 I | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Прототип | Ksp632I | ||||||||||||
| Артикул | SE-E609 | ||||||||||||
| Вариант Turbo | Отсутствует | ||||||||||||
| Высококонцентрированная версия | Отсутствует | ||||||||||||
| Сайт узнавания | 5'… CTCTTC(N)1▼ …3' 3'… GAGAAG(N)4▲ …5' |
||||||||||||
| Источник | Exiguobacterium mexicanum 6 | ||||||||||||
| Оптимальный буфер | SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) | ||||||||||||
| Оптимальная температура | 37 °C | ||||||||||||
| Температура инактивации | 80 °C | ||||||||||||
| Активность в буферах |
|
||||||||||||
| Определение единицы активности | За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37°С за 1 час. | ||||||||||||
| Субстрат для определения активности | λ-ДНК | ||||||||||||
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин Хранить при -20°С | ||||||||||||
| Лигирование | После гидролиза 5-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены. | ||||||||||||
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг λ-ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. После инкубации 5 ед фермента в течение 3 часов неспецифического гидролиза одно и двуцепочечного олигонуклеотидов не наблюдается. | ||||||||||||
| Чувствительность к метилированию | |||||||||||||
| С ферментом поставляется | 10 x SE-Буфер Y | ||||||||||||
| Примечания | |||||||||||||
| Литература |