Hpa II

Название фермента Hpa II
Прототип HpaII
Известные аналоги BsiSI, HapII, Msp I
Артикул SE-E161
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIEiФерменты типа IIE взаимодействуют с двумя сайтами узнавания: один сайт разрезается, а второй действует как аллостерический эффекторный сайт., Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… C▼CGG …3'
3'… GGC▲C …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген HpaII из Haemophilus parainfluenzae
Оптимальный буфер SE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
1005010255050
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер B. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания
Литература
  3. Сторонняя публикация Sharp, P.A., Sugden, B., Sambrook, J. Biochemistry 12: 3055-3063 (1973).
// Код для некролога