Mly113 I

Название ферментаMly113 I
ПрототипNarI
Известные аналогиNarI, BbeI, Ege I, EheI, KasI, SfoI
АртикулSE-E189
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… GG▼CGCC …3'
3'… CCGC▲GG …5'
ИсточникMicrococcus lylae 113
Оптимальный буферSE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
10025101050100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага Т7
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 3-кратным избытком фермента более 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер B.
ПримечанияБольшой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература
  1. С.В. Сосновцев, В.С. Дедков, Н.И. Речкунова, Ю.П. Зернов, С.Х. Дегтярев Определение субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции Mly113I . // Сибирский биологический журнал, Вып.2, 66-67 (1991).
// Код для некролога