Sbf I

Название ферментаSbf I
ПрототипSse8387I
Известные аналогиSdaI, Sse8387I
АртикулSE-E101
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… CCTGCA▼GG …3'
3'… GG▲ACGTCC …5'
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген Sbf I из Streptomyces species Bf61
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75500010050
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются T4 ДНК-лигазой и 90% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y.
ПримечанияБольшой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература
  1. Неопубликованные данные Абдурашитов M.A., Килева E.В., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1994).
// Код для некролога