Vne I

Название ферментаVne I
ПрототипApaLI
Известные аналогиAlw44I, ApaLI
АртикулSE-E137
Вариант TurboДоступен
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… G▼TGCAC …3'
3'… CACGT▲G …5'
ИсточникVibrio nereis 18
Оптимальный буферSE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура37 °C
Температура инактивации65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
10251002525100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер O. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Литература
  1. С.Х. Дегтярев, Н.И. Речкунова, Н.А. Нетесова, В.Е. Чижиков, Э.Г. Малыгин, Н.А. Кочкин, В.В. Михайлов, В.А. Рассказов Установление специфичности эндонуклеазы рестрикции VneI. // Биоорганическая химия, Т.13, № 3, 422-423 (1987).
  2. С.Х. Дегтярев, Н.И. Речкунова, Н.А. Нетесова, Э.Г. Малыгин, В.В. Михайлов, В.А. Рассказов Штамм Vibrio nereis — продуцент рестриктазы VneI, узнающей и расщепляющей последовательность 5′-GTGCAC-3′. // Авторское свидетельство SU 1413954 (1986).
// Код для некролога