BstSF I

Название фермента BstSF I
Прототип SfeI
Известные аналоги BfmI, BpcI, SfcI, SfeI
Артикул SE-E197
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… C▼TRYAG …3'
3'… GAYRT▲C …5'
Источник Bacillus stearothermophilus SF
Оптимальный буфер SE-буфер O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 60 °C
Температура инактивации не инактивируется
Активность в буферах
BGOWYROSE
75251005050100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер O, BSA.
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  2. Неопубликованные данные Беличенко O.A., Шевченко A.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные (1995).
  3. С.Х. Дегтярев, Г.Г. Приходько, Н.И. Речкунова Определение субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции SfeI. // Биоорганическая химия, Т.14, № 6, 848-849 (1988).
// Код для некролога