Set I

Название фермента Set I
Прототип SetI
Артикул SE-E537
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Доступна
Тип рестриктазы Тип IIPiФерменты типа IIP — классические рестриктазы типа II с палиндромными сайтами узнавания и симметричными сайтами разрезания.
Сайт узнавания
5'… ASST▼ …3'
3'… ▲TSSA …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген SetI из Streptomyces werraensis 37
Оптимальный буфер SE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура 55 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25257575100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента необходимое для гидролиза 1 pmol олигонуклеотидного дуплекса указанной структуры за 1 час при 55°С в 20 μl реакционной смеси
Субстрат для определения активности Олигонуклеотидный дуплекс
5`-CGAGTTTAT AGCT GGGCCCAAC-3`
3`-GCTCAAATA TCGA CCCGGGTTG-5`
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 50% фрагментов pBR322 ДНК сшиваются Т4 ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз
Чувствительность к метилированию не проверялось
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y.
Примечания Внимание! SetI расщепляет канонический сайт и ряд других сайтов с меньшей активностью. При длительной инкубации фермент может гидролизовать ДНК до коротких олигонуклеотидов.
Литература
// Код для некролога