Описание
Сайт узнавания:
| C↑CGG |
| GGC↓C |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген HpaII из Haemophilus parainfluenzae
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 50 | 10 | 25 | 50 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Литература:
Sharp, P.A., Sugden, B., Sambrook, J. Biochemistry 12: 3055-3063 (1973).
Дегтярев С.Х., Репин В.Е., Речкунова Н.И. Штамм бактерий Proteus vulgaris — продуцент рестриктазы PvuII. // Авторское свидетельство SU 1632974 (1991).
Дедков В.С., Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Серов Г.Д., Пучкова Л.И., Вайткявичус Д.П., Кюдулене Э.-Л.Ю., Янулайтис Э.-А.А. Штамм бактерий Staphilococcus saprophyticus продуцент сайт-специфической эндонуклеазы рестрикции SsrI. // Авторское свидетельство SU 1486512 (1989).
