Протокол для Т7 РНК полимеразы

Стандартный протокол для Т7 РНК полимеразы

На 20 мкл реакционной смеси (готовить при комнатной температуре):

• Реакционный буфер (10Х) – 2 мкл (поставляется с ферментом);
• ДНК-матрица                      – 0,2-1 мкг (должна содержать Т7 промотор);
• NTP                                      – 0,5 мМ каждого;
• Стерильная вода                 – до 20 мкл
• 2 мкл (200 ед.) Т7 РНК полимеразы

Инкубировать 1 час при 37 град С.

Примечание: в некоторых случаях в реакционную смесь рекомендуется добавлять 0,5 мкл ингибитора РНКаз (до 1 ед/мкл) и свежеприготовленный раствор DTT (до 5 мМ).