Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| ACNGT | ACN↑GT |
| TGNCA | TG↓NCA |
Источник: Bacillus stearothermophilus 4C
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 75 | 10 | 25 | 100 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента ~50% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 65°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Примечание:
Литература:
Шинкаренко Н.M., Шевченко A.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1997).
