Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GTTAAC | GTT↑AAC |
| CAATTG | CAA↓TTG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Hpa I из Haemophilus parainfluenzae
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 50 | 10 | 25 | 100 | 25 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 60% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E077T и E078T) прикладывается буфер Y.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Sharp, P.A., Sugden, B., Sambrook, J. Biochemistry 12: 3055-3063 (1973). Garfin, D.E., Goodman, H.M. Biochem. Biophys. Res. Commun. 59: 108-116 (1974).
