Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GTCGAC | G↑TCGAC |
CAGCTG | CAGCT↓G |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sal I из Streptomyces albus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
10 | 100 | 25 | 5 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК pUC19 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Arrand, J.R., Myers, P.A., Roberts, R.J., J. Mol. Biol. 118: 113-122 (1978).