Bse1 I

Название ферментаBse1 I
ПрототипBsrI
Известные аналогиBseNI, BsrI, BsrSI
АртикулSE-E035
Вариант TurboОтсутствует
Высококонцентрированная версияОтсутствует
Тип рестриктазыТип IISiФерменты типа IIS распознают асимметричные последовательности ДНК и разрезают за пределами сайта узнавания на фиксированном расстоянии. Широко используются в Golden Gate сборке.
Сайт узнавания
5'… ACTGGN▼ …3'
3'… TGAC▲CN …5'
ИсточникBacillus stearothermophilus 1
Оптимальный буферSE-буфер Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Оптимальная температура65 °C
Температура инактивации80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
75752510100100
Определение единицы активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C.
ЛигированиеПосле гидролиза 20-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 65°C.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
С ферментом поставляется10 Х SE-буфер Y
Литература
  1. Неопубликованные данные Репин В.E., Дегтярев С.Х Неопубликованные данные.
// Код для некролога